逆行射精(retrograde ejaculation)是指在性交射精时,有射精动作及快感、高潮,但精液未射出,而是逆向流入膀胱。可以引起男性不育。应首先用立位性交技术、药物或手术治疗以恢复顺行射精,如上述治疗失败,为了解决生育问题则可回收射精后尿液中精子行辅助生殖。从逆行射精患者尿液中回收精子用于人工授精前,一般采用某种营养液多次洗涤,降低了精子回收率。本文采用射精后直接排尿于HTF-HEPES液(带HEPES缓冲液的人输卵管液)中,立即离心,不洗涤,直接用上游法回收有活力精子(a级+b级),行宫腔内授精(IUI)获得成功,现报告如下:
一、资料与方法
1、临床资料:患者30岁,结婚4年,于外院诊断为逆行射精,给予中草药、麻黄素等药物治疗,未能恢复顺行射精;后经膀胱镜检查,诊断为精阜增生,行经尿道精阜电切术,未能恢复顺行射精;膀胱充盈后立位性交,亦未能恢复顺行射精。无糖尿病史,无脊柱外伤史,无膀胱颈及腹膜后手术史,体检未见异常。配偶27岁,月经规则,输卵管造影显示通畅。
2、精子回收:授精1周前开始低蛋白饮食,授精前一晚及当日晨口服碳酸氢钠1g,授精前1小时前饮用两瓶纯净水(约1200ml),1小时后两次排空膀胱,手淫射精后立即排尿于盛有10ml经37℃预热的HTF-HEPES液的无菌容器中,分装两管立即以300g×10min离心,弃上清,各加入0.5ml经37℃预热的HTF-HEPES液,放入37℃5%CO2培养箱上游1小时。
3、排卵监测及IUI:于月经周期第5、7、9天分别肌注HMG75u,第12天肌注HCG10000u,第13天出现排卵迹象时行一次IUI,即用专用IUI注精管吸取上游液0.5ml,轻轻置入宫腔并缓慢注入,其余注入后穹隆,抬高臀部仰卧1小时。授精后2周检验尿HCG,6周后B超检查有无心管搏动。
二、结果
收集到尿液22ml(含10ml HTF-HEPES液),精子总数169×106(77/10HPF),有活力精子百分率54%;上游后精子密度68×106/ml(68/HPF),有活力精子百分率提高到91%。授精后2周尿HCG阳性,6周后B超检查可见心管搏动,孕期顺利,剖宫产一健康女婴,出生体重3400g。
三、讨论
随着现代辅助生殖技术日渐成熟,为了解决逆行射精患者的生育问题,可直接回收射精后尿液中精子行辅助生殖,而从尿中回收到一定数量的精子并恢复和保持活力是保证成功妊娠的关键。从膀胱内回收精子有侵入和非侵入两种方法,前者是在手淫取精前通过插导尿管注入少量等渗缓冲液置换尿液,手淫后再次插管回收精子悬液或排空膀胱回收精子悬液,此法由于插管,易导致损伤、感染且疼痛,难以为病人接受,现已较少应用。后者是在手淫取精前应用各种方法改变尿液的渗透压及PH值以减少尿液对精子的损害,手淫后排尿,用不同的培养液处理尿液以回收一定数量的有活力精子。
精子与尿液接触5分钟,活力降低50%左右,若时间延长,则造成不可逆损害;中和尿PH值并不能保护尿对精子活力的损害,除非同时调整尿的渗透压;Kim[1]等指出,调整尿的PH值为7.5和渗透压为340mOsm/kg时,尿的浓度越高,精子活力越差,在各种含氮成分中,尿氨对精子活力有损害。因此减少精子与尿液接触时间、调整尿液渗透压和PH值及减少尿液中氨的含量是回收高质量精子及提高受孕率的关键。
PH值是影响精子活力及存活的重要因素之一,正常精液的PH值是7.2-7.8,为弱碱性,正常尿液为弱酸性,PH值平均是6.0,精子在尿液的弱酸性环境中极易受损而活力下降,如损伤不过度则可恢复。口服碳酸氢钠是最常用的碱化尿液的方法,它能提高尿液的PH值,减少对精子的过度损伤。素食者尿液呈中性或弱碱性,并且尿液中含氮化合物的浓度低。因此,瞩患者提前一周低蛋白饮食可提高尿液的PH值并减低尿氨的浓度,减少对精子的过度损伤。渗透压也是影响精子活力的重要因素之一,正常情况下,精液渗透压偏低而尿液渗透压偏高,逆行射精患者精液射入膀胱中,尿液的高渗透压使精子膜受损,活力下降。大量饮水后尿液被稀释,降低了渗透压,同时也稀释了尿氨的浓度,减少对精子的过度损伤。将尿液直接排入HTF-HEPES液中,即刻稀释了尿液,进一步调整了尿液的PH值,同时保护了精子。在进行辅助生殖前,离心后常用某种培养液进行多次洗涤,然后配成精子悬液行辅助生殖,然而每次离心弃上清时均会损失一定数量的精子,并且精子悬液中含有大量细胞碎片及死精子,有活力精子百分率较低,不利于妊娠,应尽量减少洗涤次数或不洗涤;上游法可减少细胞碎片及死精子,提高有活力精子百分率,同时使精子获能,有利于妊娠。
因此,本文联合应用低蛋白饮食、口服碳酸氢钠及大量饮水,两次排空膀胱,射精后立即排尿于盛有HTF-HEPES液的无菌容器中并立即离心,可以减少精子与尿液接触时间、碱化尿液、降低尿液渗透压及减少尿液含氮成分及保护精子;离心后不洗涤而直接上游,减少了细胞碎片及死精子,增加了有活力精子的回收数量,提高了有活力精子百分率,同时使精子获能,并获得了成功妊娠。
如果从尿液中回收的有活力精子数量少,不能做IUI者,则可做卵胞浆内单精子注射(ICSI),国内外均有成功报道。Jimenez[2]等报道应用从尿中回收的精子冷冻后行ICSI仍可妊娠并生育健康婴儿。
笔者认为,联合应用低蛋白饮食、口服碳酸氢钠、大量饮水,射精后直接排尿于培养液中,减少洗涤次数并应用上游法,可以提高有活力精子回收数量,增加受孕机会。
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