上皮膜蛋白1(Epithelial membrane protein 1,EMP1),1995由Taylor V.首次发现并命名。又叫CL-20、 TMP、B4B以及PAP,同PMP22、EMP2、EMP3以及PERP共同组成了PMP22/EMP基因家族。该蛋白由157个氨基酸残基组成,是定位在膜上的含有4个高度保守的疏水跨膜螺旋区的糖蛋白,染色体定位于12pl2.3。在成人的心、胎盘、肺、骨骼肌、肾、脾、胸腺、前列腺、睾丸、卵巢、小肠和结肠中表达 ,通过对人、鼠、兔该基因的比较发现其序列高度保守。结构和分布的特点提示EMP1同其家族的其他成员具有一些类似的功能,由于其结构的保守性,说明这些功能很可能是一些对细胞来说比较基本的重要的功能。
目前的研究认为,EMP1基因可能与细胞的粘附、增殖、凋亡、分化、肿瘤的形成、转移以及抗性形成等相关,尚未见EMP1在椎间盘中作用的报道。我们通过对已建成的人胚椎间盘髓核细胞和退变椎间盘细胞培养体系,采用RT-PCR和免疫组化方法检测了EMP1 在细胞中的表达情况,发现EMP1在正常和退变椎间盘细胞中均存在表达,且风度较高,结合其结构的高度保守特点,我们认为EMP1在椎间盘细胞的退变过程中担当着重要的角色。
研究表明在喉癌和食管癌中EMP1表达明显减低,在喉癌和食管癌细胞系中高表达该基因可导致细胞增殖减慢。在HEK293细胞中高表达该基因导致了细胞凋亡增加。与上述不同的是,脑肿瘤及消化道肿瘤中该基因表达上调,在成纤维细胞中高表达该基因导致细胞成瘤性上升。这些发现说明EMP1可以影响细胞的增殖和凋亡,且与细胞环境密切相关。那是不是该基因也参与了椎间盘的发育以及椎间盘细胞的分化呢?
为了初步探讨EMP1对椎间盘发育的影响,下一步我们在体外培养的人胚椎间盘髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)中高表达EMP1,观察细胞增殖、存活以及细胞外基质的表达变化。RNA干扰用来验证高表达该基因后细胞功能的变化。同时为了初步探讨EMP1对椎间盘退变的影响,拟体外培养退变的椎间盘髓核细胞,并干扰EMP1的在该细胞中的表达,观察细胞增殖、凋亡、以及胶原纤维的表达变化。
了解EMP1在椎间盘发育、成熟、退变中的作用,将有助于我们了解椎间盘发育和退变的机制,为椎间盘疾病的防治提供依据。同时也有助于了解EMP/ PMP22家族基因的功能,为阐明这些基因变化导致疾病的机制,以及这些疾病的治疗提供条件。
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