一、耐药检测方法的种类
HIV耐药检测可采用基因型和表型两种方法。我们常用的就是基因型方法,实际上检测的是导致表型耐药或影响病毒学应答的基因突变,就是利用PCR方法,针对药物作用靶基因(例如逆转录酶或者蛋白酶)进行序列扩增和测序。基因型耐药检测首先获得病毒特定的基因片段,测定基因序列,将序列提交给选定的数据库,通过数据库的比对得出对耐药突变和耐药的判断,一般可在1-2周内得到结果。表型耐药检测非常复杂,须首先获得病毒特定的基因片段,根据患者的基因突变构建假病毒,通过检测构建的假病毒在有药物存在情况下复制和生长的能力,通过与野生毒株的比较,来判断患者体内的病毒对药物敏感或耐受的程度。表型耐药检测要求较高,一般的机构不能完成,较难普及。
二、什么情况下应该进行耐药检测
1、新诊断的患者:不管患者是否会很快进行抗病毒治疗都主张在确诊后先进性耐药检测。已经证实耐药HIV毒株能够传播给从接收过治疗的患者,使这些患者从一开始就获得原发性耐药,被称为传播耐药。传播耐药和患者的治疗失败有关,对这类患者进行耐药检测有助于选择能够取得最大病毒抑制效果的治疗方案。
2、接受抗病毒治疗患者:对于接受抗病毒治疗的患者在改变抗病毒治疗方案时,病毒学应答失败(HIV RNA>1000 copies/ml)或病毒抑制不理想时,都应进行耐药检测,以判断是否发生耐药以及对哪种药物耐药,从而指导选择有活性的抗HIV药物进行后续治疗。对于HIV RNA为500-1000copies/ml的患者,耐药检测的难度比较大,但仍应尽量进行;对<500copies/ml的患者则不建议进行耐药检测。< span="">
3、孕妇:所有孕妇在开始抗病毒治疗前都应进行基因型耐药检测,抗病毒治疗的目的是最大程度降低血浆病毒载量并预防HIV母婴传播,首要目的是取得最大程度的病毒抑制。所以孕妇开始抗病毒治疗前应进行基因型耐药检测,对已接受治疗而HIV RNA仍能检出的孕妇也应进行耐药检测。
三、意义
耐药只是治疗失败的可能原因之一,并且与其他导致治疗失败的因素,包括包括药物的抗病毒活性不足、服药依从性差及个体药物代谢动力学差异等,密切相关。因此不能孤立地看待耐药检测结果,而应将其放在病毒载量和CD4+T淋巴细胞计数的变化、临床表现及其他检验项目改变的背景下分析。耐药检测结果的解释必须结合既往治疗史、血浆病毒载量的长期变化及依从性的程度。
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