[摘 要]:目的研究人乳头瘤病毒(HPV)亚型感染的情况,探讨HPV DNA检测在宫颈癌防治方面的意义。方法 应用 DNA杂交技术对3700例妇科门诊患者HPV基因分型检测。结果 3700例患者中,HPV感染者1071例,HPV感染率为28.95%,HPV感染人次1400人次。患者中高危型HPV (16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68) 1124人次,占感染总人次的80.29%;低危型HPV (6、11、42、43、44) 151人次,占感染总人次10.79% ;中国人群常见型HPV (53、66、P8304) 125人次,占感染总人次的8.93%。21种HPV基因亚型多重感染患者250例,占HPV感染者23.34%。其中双重感染者占多重感染者77.6%。结论 DNA杂交技术检测HPV基因分型,可1次检测多种亚型,有利于对HPV多重感染的诊断和宫颈癌的防治,可作为宫颈癌筛查的手段。
讨论
在普通人群中HPV感染非常普遍,正常妇女HPV感染率为20% ~46% [3],也有报道在性生活活跃者一生中感染HPV的机会高达75~80%[4]。本研究显示HPV感染率达28.95% ,与文献报道相似。当机体感染HPV,病毒基因可整合到宫颈细胞,机体正常的免疫系统可识别感染细胞并加以清除。若感染细胞继续存活并增生,可发展为癌前病变或宫颈癌。有文献报道高危亚型HPV的持续性或反复感染被确定为宫颈癌发生的最主要原因[5],而Lee等[6]进一步研究了多重HPV感染与宫颈癌的关系,结果发现单一HPV感染使宫颈癌的患病风险增加19.9倍,而多重HPV感染使该风险增加到31.8倍。鉴于高危型HPV与宫颈癌的密切相关性,高危型HPV已作为筛查早期宫颈癌的重要标志应用于临床,而临床资料亦证明高危型HPV检测可进一步缩小宫颈癌高风险性人群范围,使宫颈癌早期筛查更具针对性。
有研究显示,在宫颈癌的普查计划和对于有轻度细胞学异常患者的追踪过程中,HPV的检测有潜在的应用价值[7]。细胞和组织学的检测可以确定是否感染HPV,但不能确定HPV的基因型别。核酸印迹法是HPV基因分型的金标准,适用于HPV分型和HPV -DNA分子质量鉴定,灵敏度高,但操作复杂,需新鲜组织标本,不便于临床推广。DNA杂交技术是近年发展起来的,是一种高通量基因检测技术检测HPV基因分型,可1次检测HPV多种亚型,有利于对HPV多重感染的诊断和对患者先后多次检测分析或治疗前后HPV型别的分析,从而有利于宫颈癌的防治,是目前认为HPV DNA检测和分型比较好的方法。
本研究对3700例妇科门诊患者进行HPV检测,检测出21型HPV -DNA中的全部型别,共检测出1071例(1400人次)HPV感染患者,高危型感染达1124人次,占总感染人次的80.29%,可见高危型HPV感染问题的严重性。高危型患者其亚型感染比率由高到低依次为HPV :16、58、52、33、18、31、68、39、56、59、35、45和51型。低危型依次为HPV11、6、42、43、44型。高危型基因型别以HPV -16、HPV-58型为主,其次为HPV:52、33、18型,依次占高危型感染人次的29.36%、18.32%、17.97%、9.88%和5.61%。HPV分布有地域性,Bulk[8]等报道全世界高危型HPV主要是HPV -16、18型。而本研究高危型分布有所不同,HPV -58型仅次于HPV -16,与我国杨英捷[9]等报道一致,可能与我国地域辽阔,不同民族和地区存在差异有关。
本研究利用DNA杂交技术这一高通量基因检测技术,仅需一次扩增,即可同时检测21种高、低危型和中国人群常见型HPV。该方法具有通量高、灵敏度高、特异性好、可检测多重感染等优点,可用于宫颈癌等疾病的早期预警和诊断,有利于防治宫颈癌的发生并了解HPV感染的转归,适用于大规模临床筛查。
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