试管婴儿的步骤因患者的具体情况而有一些差异。它可以是简单的体外受精和胚胎移植,也可能是体外受精加上其他的辅助生殖技术,如显微授精、辅助孵化、外科方法取精、卵子的体外成熟、卵子/精子/胚胎冷冻、胚胎着床前诊断等。
试管婴儿的基本步骤是:让女性产生数个卵子,将卵子从卵巢内取出,精子从男性取出,在试管婴儿实验室里使精子和卵子受精,受精后的卵子体外培养以便选择好的胚胎用来移植,将胚胎移植到患者的子宫,胚胎移植后的妊娠支持,胚胎移植后的妊娠检查,妊娠后的胎儿数日检查及胚胎着床部位的确定等。
试管婴儿的操作步骤及程序有以下几方面:
(1)体外授精前处理及排卵监测:为了适时从卵巢采集排卵前成熟或近成熟的卵母细胞,精确地监测排卵前卵泡成熟的进程极为重要。利用自然月经周期采卵往往只能取到一个卵细胞。为了增加成功的机会,增加发育卵泡以获得多个卵子,现多采用有刺激周期方法(也称促超排卵),一次可取得3个以上的卵母细胞。
①自然月经周期中进行排卵前监测:世界上首例试管婴儿成功就是用自然周期监测排卵期排卵的。通过基础体温测定、内分泌测定(血雌二醇值、尿中黄体生成素值)和B超的监测,配合临床观察(宫颈粘液变化等)确定取卵时日。
② B超监测:应与内分泌测定密切配合。
③促超排卵:目前促超排卵主要有4种方案:克罗米芬―人绝经后促性腺激素(HMG)―绒毛膜促性腺激素(HCG);HMG―HCG;促卵泡激素(FSH)―HCG;促性腺激素释放激素(GnRH)―HMG―HCG。常规使用克罗米芬―HMG―HCG方案。
(2)采卵:在确定的时间采卵。采卵的途径有:
①剖腹直视下穿刺卵泡取卵。
②经腹腔镜取卵。
③B超引导下经腹壁、尿道膀胱或阴道穿刺取卵。目前多采用经腹腔镜或B超指引下经阴道取卵,后者尤为方便。
(3)卵子培养:吸出卵泡液后,立即寻找卵子。取出卵细胞后,置入装有人工培养液的培养皿内,并放入一定量的卵泡液,有助于卵细胞的生长发育。培养时间取决于所取卵泡的成熟度,成熟者一般培养2~6小时。
(4)体外授精:收集精液后应用洗涤法使精液体外获能,然后放入装有卵细胞的培养液内,培养15~24小时,在解剖显微镜下检查,如看到有两个原核存在于卵母细胞原浆中表示已授精,再继续培养36~42小时。当镜下观察到受精卵已分裂至4~8个细胞时,可考虑作胚胎移植。
(5)胚胎移植:阴道及宫颈用生理盐水清洁再用培养液擦洗,将金属或塑料导管置入颈管内。另一助手在显微镜下用1.3mm的聚四氟乙烯管从培养液内吸出胚胎细胞加吸0.03~0.05ml 培养液或0.03~0.05ml受试者血清,将此管插入宫颈管导管内放至距宫底0.5cm处,送胚胎入宫腔。胚胎移植后需卧床24小时,限制活动3~4天,接受黄体酮治疗。移植后2周作β-GCG测定,如无妊娠情况,停用黄体酮。移植成功的妊娠属高危妊娠予以监护。
相关文章