目的 建立骨髓干细胞库,应用第三方骨髓干细胞治疗慢性移植物肾病,观察临床疗效。
方法 获取供者骨髓成分100-200ml,提取单个核细胞,进行细胞计数、活力鉴定及CD34+细胞计数,置于-80℃储存,建立骨髓干细胞库。自2010年至今,将临床诊断为慢性移植物肾病的患者分为:
(1)对照组(20例);
(2) 干细胞治疗组(15例)。入选标准为血肌酐170-300μmol/L(2-3mg/dl),24小时尿蛋白定量300mg-2000mg。干细胞治疗组患者接受解冻后骨髓细胞输注,细胞数108-109,方法为自股动脉介入行肾动脉定位后,将总容积50ml细胞悬液于10min缓慢注入。术后监测外周血CD45+、CD34+细胞计数,检测血肌酐和24小时尿蛋白定量变化。两组患者采用的原免疫抑制方案不变,免疫抑制强度不行调整。随访一年,判断第三方骨髓干细胞治疗对慢性移植物肾病的临床疗效。
结果 供者骨髓成分单个核细胞计数每份为5×108-109,活性细胞比>90%,CD34+细胞占CD45+细胞数0.01-0.05%。解冻后将细胞保存于50ml血细胞储存液中,细胞计数每份为108-109,活性细胞比70-80%,CD34+细胞占CD45+细胞数0.01-0.02%。干细胞治疗组患者接受骨髓干细胞治疗前外周血CD34+细胞占CD45+细胞数0.01%,治疗后3天0.05%-0.3%,治疗后7天0.03%-0.2%,治疗后1月0.03%-0.1%,治疗后3月0.02%-0.05%,治疗后6月0.01%-0.02%;治疗后3月血肌酐较治疗前下降20-100μmol/L,平均35(2-3mg/dl),治疗后12月血肌酐平均值较治疗仍下降25μmol/L;24小时尿蛋白定量治疗后12月平均值下降300mg。对照组术后一年随访肾功能无改善。
结论 骨髓干细胞库建立后,在细胞解冻环节中细胞质量和数量的控制上仍有技术改进的必要;应用第三方骨髓干细胞治疗可以改善慢性移植物肾病患者的肾脏功能,能够成为一种可供选择的新的治疗手段。其详细机制有待进一步的探索。
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