黄金固肾冲剂对实验性肾病综合征大鼠的治疗作用方法:
40只大鼠随机分为A、B、C、D四组,前三组用盐酸阿霉素(ADR)按5mg/kg尾静脉注射复制NS大鼠模型;A组灌服黄金固肾冲剂;B组灌服卡托普利片;C组为模型组;D组与模型组同时注射生理盐水为正常对照组。检测大鼠24h尿蛋白、生化指标(Aib、CHO、TG、HDL、Ca、P)及肾功能指标(BUN、Cr、UA),并作病理光镜检查。
结果:大鼠模型的24h尿蛋白定量较正常对照组明显增高,都有低蛋白血症,血清TG、CHO明显升高。肾组织病理改变明显。黄金固肾冲剂能明显改善大鼠模型的尿蛋白及脂质代谢异常,并减轻肾损害。 结论:黄金固肾冲剂对实验性肾病综合征模型有治疗作用。
肾病综合征(Nephrotic Syndrome,NS)是人类最常见的肾脏疾病之一,以大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症及不同程度水肿为特征。目前仍以糖皮质激素为主要治疗手法。中医中药为辅助手段。我们通过近十年的临床钻研,自拟黄金固肾冲剂治疗NS,有减少蛋白尿,改善肾功能等功能,疗效可靠。本实验采用ADR肾病综合征大鼠模型,观察黄金固肾冲剂对实验性肾病综合征的治疗效果。
资料与方法
1 、动物分组 体重(260±15)g雄性SD大鼠(购自第四军医大学实验动物中心),共40只,随机分为4组,每组10只,A组为NS灌注黄金固肾冲剂组;B组为NS灌注卡托普利组;C组为NS模型组;D组为正常组。
2 、材料
2.1 药品和试剂
2.1.1 自拟黄金固肾冲剂由生黄芪、金樱子、当归、党参、黑大豆、白术、丹参、川芎、水蛭、生地、仙灵脾等16味中药组成。由本院制剂室制成颗粒。
2.1.2 阿霉素(ADR)为汕头经济特区明治医药有限公司制造,(批号 313001),10mg/瓶。
2.1.3 对照药品 卡托普利片为上海普康制药厂生产(批号010619)。
2.1.4 人血清白蛋白购自上海生物制品研究所,(批号200112008),5g/瓶;高胆固醇饲料(10g/L),由固原卫校动物中心加工。
3 、动物模型的建立
A、B、C组大鼠尾静脉注射阿霉素(ADR),剂量为5.0mg/kg 体重;D组同时尾静脉注射0.9G生理盐水5.0ml/kg体重。
4、实验方法
4.1步骤
4.1.1 准备过程 将经尾静脉注射后的大鼠放入笼中单个喂养,自由饮水,室温20℃左右.每组均用基础饲料喂养1周后开始实验.D组继续用饲料喂养12周,A、B、C三组用高胆固醇饲料(10g/L)喂养12周,并在开始喂养的第1天,每只大鼠均从尾静脉注射人血白蛋白200mg/kg。D组在其他组喂养高胆固醇饲料的第1天,每只从尾静脉注射等体积的0.9G生理盐水。
4.1.2 完成过程 在实验第1天,A组以625mg.kg.-1d-1的黄金固肾冲剂灌服;以卡托普利15.6mg. kg.-1d-1配蒸馏水至等体积灌服(药物剂量按实验动物及人的体表面积推算剂量及人与动物的用药量方法计算);D组及C组以等体积0.9G生理盐水灌服,灌服时间为每日8时及17时,连续灌服12周。全部大鼠在造模型前1天,造模型后2、4、6、8、12周末代谢笼中收集24h尿,进行尿蛋白定量测定,每6、12周末取尾静脉血进行生化及肾功能指标测定。实验第12周末杀鼠取标本,迅速摘除双肾,行肾脏病理检查。
4.2 血生化指标检查 收集大鼠6、12周末血,分离出血清,采用Beckmen-7x自动生化分析仪(美国)及生化试剂盒检测白蛋白(ALb)、胆固醇(CHO)、总甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血钙(Ca)、血磷(P)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)。
4.3 肾脏病理 观察肾脏外观并进行光镜检查。肾脏取出后放入10G中性福尔马林液中固定,经脱水两次,石蜡包埋、切片等步骤后制成5µm厚的石蜡片。用HEP和PAS染色,光镜下观察肾脏形态学改变方。
4.4 体重和浮肿 各组大鼠4、12周称体重1次,并观察腹水情况及四肢、阴囊、爪的水肿情况。
5 、统计学处理 数据用 ±s表示,A、B、C三组单因素差异在进行方差齐性检验后,用F检验进行统计分析,两组间比较用Q检验,C组、A组和B组与D组之间的两两比较用t检验。
结果
黄金固肾冲剂对NS模型24h定量定量的影响 实验前各组24h尿蛋白定量测定无差异,造模后第二周开始模型组尿蛋白开始增多,第4-6周达高峰,第12周仍处于较高水平。A组及B组相比差异有显著性。
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