本研究近日发表在中科院1期期刊《ACS AMI》上，影响因子6.723，为广大肺癌患者带来了新的福音。

第四军医大学唐都医院胸腔外科王磊

目的：EGFR基因突变在肺腺癌中发生率约50%，尤其是外显子19缺失（E19del）、外显子21（L858R）突变，与肿瘤对络氨酸激酶抑制剂（TKIs）的敏感度有重要关系。然而，只有30%的患者可以获得手术切除的肿瘤标本进行EGFR基因检测，70%的患者只能依靠小块组织活检或者脱落细胞进行EGFR基因检测。目前使用胸腔积液进行肺腺癌脱落细胞EGFR基因检测的敏感度不超过50%。本文旨在使用表面增强拉曼光谱（SERS）检测肺腺癌患者胸腔积液中EGFR突变状态，评估该方法诊断的敏感度和特异度。

方法：使用还原法制备合成直径90nm的海胆样金颗粒，依次包被结晶紫分子、EGFR突变特异性抗体、巯基化聚乙二醇（PEG-SH），最终合成EGFR突变检测纳米金。使用肺腺癌H1650，H1975及A549作为细胞模型，检测该复合纳米金靶向性和灵敏性。收集30例肺腺癌患者的胸腔积液400ml，使用该复合纳米金检测胸腔积液中脱落细胞的EGFR突变状态，同时使用ADMS法和免疫组化法对比检测胸腔积液中EGFR突变状态，最终建立该复合纳米金诊断胸腔积液中EGFR基因突变状态的敏感度和特异度。

结果：合成直径90nm的纳米金，该粒子表面具有15nm海胆样金刺。给该粒子表面包被结晶紫分子后，测算该颗粒拉曼信号增强因子达3.2×108。依次包被结晶紫分子、EGFR突变特异性抗体以及聚乙二醇（PEG-SH）后，该粒子具有良好的靶向识别功能和生物兼容性，紫外分光光度计和透射电镜监测显示该靶向粒子能够在液相环境中稳定存在。在肺癌H1650（E19del突变）和H1975（L858R）细胞中，该粒子可以逐渐进入细胞中，并获得良好的SERS信号，而在对照A549（wt-WGFR）细胞中，仅能获得极微弱的SERS信号。40425px-1处峰值为代表结晶紫分子的代表峰值，结果显示该处的SERS信号与细胞中金纳米颗粒的数量成正比。使用线性回归分析比较SERS信号强度与肺癌细胞数量，结果显示该方法检测的最低细胞数目为每毫升液体中50个癌细胞。进一步，收集30例肺腺癌患者的胸腔积液，其中EGFR突变患者12例，野生型患者18例，该粒子与胸腔积液中脱落细胞共孵育后，检测SERS信号显示该法检测胸水中EGFR突变的敏感度58% (7/12) 、特异度83% (15/18)。免疫组化法检测EGFR突变敏感度30%（4/12）、特异度100（18/18）。   

结论：EGFR突变纳米金能够有效检测癌性胸腔积液中肺癌细胞的EGFR突变类型，是一种新型的快速、高效的检测方法。