血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)是一种强烈的内皮细胞有丝分裂原和血管生长因子[1]。细胞增殖和凋亡的不平衡的病理状态与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究检测卵巢癌组织中VEGF的表达及其与卵巢癌细胞凋亡的关系，并对其意义进行初步探讨。

　　1、材料与方法

　　1、1临床资料45例卵巢癌标本取自本院1994~2001年手术切除后存档蜡块，其中浆液性囊腺癌27例，黏液性囊腺癌3例，子宫内膜样腺癌15例。年龄35 ~70岁，中位年龄51岁。按照1986年FIGO分期，Ⅰ~Ⅱ期14例，Ⅲ~Ⅳ期31例。选择同期11例因子宫肌瘤切除的正常卵巢组织作对照，年龄46~51岁，中位年龄50岁，两组具有可比性。

　　1、2 方法。采用免疫组织化学SP法检测VEGF的表达。VEGF的多克隆抗体购自北京中山生物技术有限公司(抗体效价为1:100)。细胞凋亡检测采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP断端标记技术(terminaldeoxynudeotide transferase mediated nick end labeling, TUNEL),试剂合购自北京中山生物技术有限司。石蜡块标本连续切片，厚度为4微米，肿瘤组织切片进行微波抗原修复。严格按试剂盒说明进行试验。PBS代替一抗作阴性对照。

　　1、3结果判定

　　1、3、1SP法 VEGF染色定位于肿瘤细胞胞质内和(或)细胞膜被染成棕黄色(见图1)。参照刘薇等[2]报道方法，随机选择5个高倍视野(× 400)计数肿瘤细胞总数和阳性细胞个数，得出阳性细胞百分率，并依阳性率分为：背景清晰无着色为-，阳性细胞数<10％为+，阳性细胞数10％~70％为++，阳性细胞数>70％为+++。本研究中-，为阴性;+，为弱阳性;++及+++为强阳性。

　　1、3、2TUNEL:凋亡细胞的核呈淡紫色，细胞核形态呈碎片状，不规则，大小不一，而正常非凋亡细胞和阴性对照则细胞核被苏木精复染呈蓝色，核相对较大，形态大小较为一致。随机选择5个高倍视野(× 400)计数肿瘤细胞凋亡数≥5％为阳性，<5％为阴性[3]。

　　1、4统计方法。采用SPSS10.0统计软件包进行单因素方差分析。

　　2、结 果

　　2、1 VEGF在卵巢癌组织中的表达 86.7％(39/45)的卵巢癌细胞表达VEGF，其中，12.8％(5/39)表达为弱阳性(+)，87.2％(34/39)为强阳性(++~+++);正常卵巢组织可见弱阳性表达。Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌组织中VEGF强阳性表达率为35.7％，而Ⅲ~Ⅳ期则为93.5％，两者比较差异显著(P=0.001)。

　　2、2 卵巢癌组织中的细胞凋亡情况。45例卵巢癌中60％(27/45)细胞凋亡阳性，40％(18/45)细胞凋亡阴性。凋亡阴性组中VEGF强阳性表达率88.9％(16/18)，凋亡阳性组中VEGF强阳性表达率40.7％(11/27)，两者比较差异显著(P=0.039)。

　　3、讨 论

　　3、1肿瘤的生长和转移是一个复杂的多步骤过程，受诸多因素的影响。其中，肿瘤血管生成起重要作用。肿瘤细胞通过合成分泌血管生成因子调节肿瘤组织的血管生成。VEGF是重要的血管生成因子之一，在肿瘤血管生成中起着重要的作用。本研究结果显示，45例卵巢癌标本中39(86.7％)例有不同程度的VEGF蛋白表达，其中强阳性表达34例，主要集中在Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌中，而弱阳性表达仅5例，主要集中在Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌中，而在正常卵巢皮质中未见到VEGF强阳性表达，VEGF水平升高，无瘤生存时间及总的生存时间缩短，这与文献[4、5]报道一致。表明VEGF不仅与肿瘤恶性表型相关，而且在卵巢癌进展中起关键作用，并且其表达量与预后密切相关，可作为预测卵巢癌预后的一个间接指标。

　　3、2 卵巢癌中VEGF表达与细胞凋亡

　　多数学者认为，肿瘤的发生、发展不仅是细胞增殖失控的结果，也可能是由于细胞凋亡受阻，即细胞增殖与凋亡的失衡决定了肿瘤的生长速率。细胞是增殖还是凋亡受许多因素影响，是一个双向调节过程。实验应用TUNEL法检测发现，卵巢癌组织伴有细胞凋亡，阳性率为60％，提示细胞凋亡与卵巢癌有一定关系。

　　研究证实，在肿瘤发生和发展的早期就有新生血管形成，而肿瘤细胞的自发性凋亡受肿瘤组织中新生血管化程度的显著影响。有报道[6]血管生长因子通过介导血管形成而促进肿瘤细胞生长，抑制肿瘤细胞凋亡。在本研究中，卵巢癌细胞凋亡阴性组VEGF表达阳性率明显高于卵巢癌细胞凋亡阳性组，从而我们有理由推断，阻断VEGF的血管生成作用可能通过促进肿瘤细胞凋亡而达到抑制肿瘤生长。