流式细胞仪检测细胞分化抗原

　　流式细胞仪分析：将标本细胞用荧光抗体标记，制备成悬液，使荧光标记的细胞一个个通过仪器的毛细管，分别辨认细胞形态大小和荧光特征，称为FACS（flow cytomatric cell sorting）。其优势是短时间可分析数万个细胞，还可以用计算机记录处理，快速地对各个细胞进行多参数定量分析。我们使用4色荧光分析可以识别一个细胞上同时存在的4种荧光的颜色，对分析双表型白血病和微小残留病十分有利。

　　欧洲EGIL提出的白血病免疫分型特征

　　1、ALL，包括 B 细胞系4 型， T 细胞系 5型和表达1－2个髓系标志的ALL （My+ALL）。

　　2、AML包括6型，粒单细胞性； 红系； 巨核细胞性； 低分化髓系（M0-AML）; TdT阳性AML; 表达1－2个淋巴细胞系标志（Ly+AML）的AML。

　　3、双表型急性白血病（BAL）。

　　4、未分化急性白血病。分别提出ALL的免疫分型； AML免疫分型和双表型ALL指标系统。

　　欧洲EGIL急性淋巴细胞白血病（ALL）的免疫分型

　　1、B 细胞系ALL （a） 　　　　　　　　　（CD19+和/或 cCD79a+和/或cCD22+）

　　pro-B-ALL 　　　　（B－Ⅰ）　　　　　　  （不表达其他B细胞分化抗原）

　　普通 ALL　　　 　 （B－Ⅱ） 　　　　  　　CD10+

　　Pre－B-ALL　　　 （B－Ⅲ） 　　　　　 　　胞浆IgM+

　　成熟 B-ALL 　　　（B－Ⅳ） 　　　　　　  有胞浆或者表面 Igκ-， Igλ

　　2、T 细胞系ALL （b）　　　　　　　　　（胞浆或者膜 CD3+）

　　pro-T ALL 　　　　（T－Ⅰ） 　　　　 　　CD7+

　　pre T ALL 　　　　（T－Ⅱ） 　　　 　　　CD2+ 和/或 CD5+ 和/或 CD8+

　　cortical T ALL　 （T－Ⅲ） 　　　　　  　CD1a+

　　成熟 T ALL　　　 （T－Ⅳ） 　　　　　  　膜 CD3+，CD1a-

　　α/β+ T ALL 　　（a组） 　　　　　   　抗 T 细胞α/β+

　　γ/δ+ T ALL 　　（b组） 　　　　　   　抗 T 细胞γ/δ+

　　3、ALL 伴有髓系抗原表达 （My+ALL）A

　　（a） 阳性是至少3个标志中 2个阳性。除B-Ⅳ TdT- 大部分病例 TdT+，HLA DR+，

　　（b） 大部分病例 TdT+， HLA DR-CD34-，但这些标记在分型中不考虑

　　欧洲EGIL急性粒细胞白血病（AML）分型

　　1、粒单细胞系列

　　抗-MPO+， CD13+， CD33+， Cdw56+， 和/或CD117+.至少2个或者更多的髓 样标志阳性

　　2、红细胞系列 （纯红，M6）

　　早期/不成熟：不能用标志分型

　　晚期/成熟：抗血型糖蛋白A+

　　3、巨核细胞系列（M7）

　　CD41+，和/或CD61+（膜或者胞浆）

　　4、早期髓细胞（M0）（只能用免疫标志确定）

　　有其他粒单细胞AML的表型但是细胞化学 和淋巴细胞特异性标志 CD3， CD79a，CD22阴性

　　5、TdT+ AML

　　6、AML伴有淋巴细胞抗原的表达（Ly+AML）应用抗血清和单克隆抗体

　　可将ALL细胞分成：前B细胞（80％），T细胞（10～15％），有表面免疫球蛋白B细胞（<5％）和CALLA （common ALL抗原）型（大约50％）。

　　双表型白血病

　　一些ALL患者的原始细胞同时表达粒细胞抗原

　　末端脱氧核酸转移酶（TdT）： 大约95％的ALL（除B细胞ALL中形态学上常为FAB分型的L3型末端脱氧核酸转移酶（TdT）的表达增高。如果酶的浓度不升高，ALL的诊断值得怀疑。 20％的AML也表达TdT，它作为ALL特异性标志的作用有限。